基于网络药理学与分子对接探讨木瓜治疗膝骨关节炎的分子机制

目的:基于网络药理学探索木瓜治疗膝骨性关节炎的分子作用机制。方法:基于口服生物利用度(OB)及药物相似性(DL),通过中药系统药理学数据库(TCMSP)筛选木瓜的主要活性成分。运用GeneCards、OMIM数据库建立膝骨性关节炎靶标数据库。通过Cytoscape 3.7.1软件构建"活性成分-作用靶标-疾病"可视化交互网络;运用STRING数据库构建蛋白互作网络,分析相关蛋白互作关系;对核心靶点进行京都基因与基因百科全书(KEGG)通路及基因本体(GO)生物过程富集分析。通过Discovery Studio软件对药物活性成分与疾病靶点进行分子对接验证。结果:筛选得到木瓜活性成分3个,涉及44个作用靶点。网络分析结果表明,靶点主要涉及调节细胞代谢、凋亡等生物学过程,通过调节细胞凋亡、肿瘤坏死因子(TNF)、p53、核转录因子-κB(NF-κB)、糖基化终末产物(AGE)及其受体(RAGE)等信号通路来发挥治疗膝骨关节炎的作用。分子对接结果表明,木瓜活性成分与膝骨性关节炎的血管内皮生长因子A(VEGFA)、白细胞介素-6(IL-6)、雌激素受体1(ESR1)等靶点对接吻合度较好。结论:木瓜治疗膝骨性关节炎具有多系统、多成分、多靶点的特点;其可能的作用机制包括控制炎症,调控关节软骨代谢、生长和修复,促进细胞增殖、分化,抑制细胞凋亡和抵抗氧化应激等以达到控制疾病发生发展的目的;木瓜中槲皮素、白桦脂酸、表儿茶酸等活性成分可能是其治疗膝骨性关节炎的物质基础。     

碘乙酸钠诱导的大鼠膝骨关节炎模型肠道菌群变化及其潜在影响

目的:研究碘乙酸钠诱导的大鼠膝骨关节炎(KOA)模型肠道菌群变化情况,探究肠道菌群与KOA的潜在联系。方法:将SPF级大鼠分为空白对照组和KOA组,通过膝关节局部注射碘乙酸钠制造大鼠KOA模型。通过16SrDNA检测大鼠粪便中的肠道菌群变化情况,蛋白印记法检测结肠组织中NF-κB和TNF-α蛋白表达,RT-qPCR检测结肠组织中Caspase-1和IL-1β基因表达情况,苏木精-伊红染色观察结肠黏膜通透性变化,苏木精-伊红染色观察关节滑膜和软骨组织的病理变化情况。ELISA检测血液上清中LBP,IL-1β,TNF-α及IL-10炎症因子水平。结果:与空白对照组相比,从KOA组中筛选出明显变化的肠道菌群,以Akkermansia和疣微菌门变化最为显著,结肠黏膜通透性增加,结肠组织中NF-κB p65及TNF-α蛋白表达升高,结肠组织中Caspase-1和IL-1β基因表达升高,血液中促炎因子LBP,IL-1β及TNF-α蛋白含量升高,抗炎因子IL-10蛋白含量降低。结论:KOA病理状态下肠道菌群发生变化,结肠炎症反应增强,结肠炎症反应或许在提高全身炎症反应水平、促进与肠道菌群相关的KOA的病理进程中起到重要的桥梁作用。     

翻转课堂联合CBL教学在中医辨证见习中的应用

目的探讨翻转课堂联合CBL教学法应用于中医学辨证见习教学中的效果。方法将60名学生随机分为两组,每组30名,学生均来自于中南大学湘雅医学院临床医学专业2016级五年制本科。翻转课堂联合CBL教学法被应用于试验组,传统教学模式被应用于对照组,教学效果评价采用理论知识考核与学生满意度调查的双向评价模式。结果试验组的见习内容知识考核卷面成绩和满意度调查得分均高于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论在中医学辨证见习课中,翻转课堂联合CBL教学法的教学效果优于传统教学模式。     

剔络养血明目方对青光眼患者视功能改善的疗效分析及对视神经血流密度的影响

目的:探讨剔络养血明目方对青光眼患者最佳矫正视力(the best corrected visual acuity,BCVA),视野等改善的作用,分析该方剂对视神经血流密度(vessel density,VD)和视网膜神经纤维层厚度(retinal nerve fiber layer thickness,RNFL thickness)的影响。方法:回顾分析2017年1月至2020年7月采用剔络养血明目方治疗的117例原发性青光眼患者共计234只眼的临床数据;回顾剔络养血明目方治疗的57只眼作为治疗组,另选取性别、年龄、疗程相匹配的未行该方治疗的57只眼作为对照组。分析治疗前后BCVA,视野平均敏感度(value and mean sensitivity,MS),平均缺损(mean deviation,MD)的变化。利用光学相干断层扫描血管成像技术(optical coherence tomography angiography,OCTA)分析治疗前后视神经VD及RNFL厚度的变化。结果:治疗后较治疗前BCVA提升(P=0),MS值增加(P=0),MD值减小(P=0.001),整个视盘扫描区域(P=0),视盘内(P=0.004)及盘周各分区(P0.05)的VD增加,RNFL厚度(除视盘下方鼻侧区外)无明显变化。治疗组治疗后较治疗前,MS增加(P=0.003),MD减少(P=0.024),对照组视野各指标治疗后较治疗前变化无统计学差异。结论:对于眼压稳定在目标眼压范围内的青光眼患者,剔络养血明目方能够改善其视功能和视神经VD,但对RNFL厚度无明显影响。     

1,8-桉叶油素自微乳给药系统的制备及质量评价和细胞摄取研究

目的优化1,8-桉叶油素(1,8-cineole,1,8-Cin)自微乳给药系统(1,8-cineole self-microemulsion drug delivery system,1,8-Cin-SMEDDS)处方,对其进行表征并进行细胞摄取考察。方法通过绘制伪三元相图,确定1,8-Cin-SMEDDS有效自乳化区域,进行初步处方筛选。以粒径和载药量为指标,采用星点设计-效应面法对1,8-Cin-SMEDDS处方进行优化并验证。荧光显微镜观察高糖损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)对1,8-Cin-SMEDDS的摄取情况。结果 1,8-Cin-SMEDDS的最佳处方是大豆油(7.5%)与1,8-Cin(22.5%)为混合油相,HS15(56%)为乳化剂,乙醇(14%)为助乳化剂,滴加纯水至8m L得半透明略带蓝色乳光液体。透射电镜观察其外观呈球形液滴,激光粒度Zeta电位测定仪测得平均粒径为(131.68±1.44)nm,Zeta电位为(-10.03±1.63)m V;HPLC法测得包封率为(99.890±0.012)%,载药量为(224.750±0.028)mg/g。HUVEC细胞摄取实验结果表明,细胞对1,8-Cin-SMEDDS的摄取高于游离1,8-Cin。结论 1,8-Cin-SMEDDS制备方法简便,重复性好,所得1,8-Cin-SMEDDS外观良好,包封率高,理化性质稳定,且能促进细胞摄取。     

帕博丽珠单抗治疗晚期黑色素瘤的不良事件及相关性分析

背景与目的:免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitor,ICI)已成为肿瘤治疗的重要手段,然而伴随其显著疗效的是药物相关不良反应。观察帕博丽珠单抗在晚期黑色素瘤治疗中的安全性;初步探讨程序性死亡[蛋白]-1(programmed death-1,PD-1)单抗不良事件发生的预测因子及与疗效的相关性。方法:收集2016年8月-2017年7月期间在北京大学肿瘤医院入组一项"帕博丽珠单抗作为二线治疗中国局部晚期或转移性黑色素瘤的Ⅰb期临床研究(Keynote-151)"的54例患者的临床资料,包括性别、年龄、疾病分期、原发部位、既往化疗史、美国东部肿瘤协作组(Eastern Cooperative Oncology Group,ECOG)评分及基线外周血细胞计数,以及药物治疗相关不良事件和疗效相关信息。不良事件根据通用不良事件术语标准(Common Terminology Criteria Adverse Events,CTCAE)4.03版评价,疗效根据实体肿瘤疗效评价标准(Response Evaluation Criteria in Solid Tumors,RECIST)1.1标准评估。结果:帕博丽珠单抗在晚期黑色素瘤治疗中不良事件发生率达88.9%(48/54),严重不良事件发生率为13.0%(7/54),无死亡病例;肝毒性是导致中断和终止用药的主要原因;分析严重不良事件的发生与所观察各项临床特征及实验室检查指标之间均无显著相关性;不良事件的发生与疗效相关分析提示白癜风(P=0.001)和甲状腺功能异常(P=0.007)与疗效相关。结论:帕博丽珠单抗治疗晚期黑色素瘤不良反应发生率较高,但以1~2级为主,耐受性较好;肝毒性对试验药物应用影响最大;白癜风和甲状腺功能异常均可能是疗效较好的预测因子。     

MiRNA let-7a对人喉鳞癌细胞增殖的抑制作用CSCD

目的探讨miRNA let-7a调控高迁移率族蛋白2(HMGA2)对人喉鳞癌细胞株TU212增殖的影响。方法合成let-7a模拟体(let-7a mimics)并采用阳离子脂质体法瞬时转染入喉癌TU212细胞,裸鼠皮下注射TU212细胞,构建裸鼠移植瘤模型。RT-qPCR和Western blot法分别检测转染后TU212细胞及移植瘤内let-7a和HMGA2的表达。结果在过表达let-7a的喉癌TU212细胞中,HMGA2的转录和翻译水平下调,细胞增殖能力降低。体外成瘤实验证实,与let-7a NC组和空白对照组相比,转染let-7a mimics的喉癌细胞TU212成瘤组织的质量和体积均显著下降;let-7a过表达的TU212成瘤组织中HMGA2的mRNA和蛋白水平均明显下调。结论let-7a能显著抑制HMGA2的mRNA和蛋白表达,进而显著抑制喉癌细胞的增殖。     

江苏省13家医院新生儿严重高胆红素血症现状调查

目的 了解江苏省新生儿严重高胆红素血症的发生情况及诊治、随访等管理情况，为新生儿严重高胆红素血症的预防及规范化管理提供依据。方法 以2018年1~12月江苏省13家医院收治的严重高胆红素血症新生儿为研究对象，回顾性分析患儿的临床资料及随访资料。结果 江苏省13家医院2018年严重高胆红素血症新生儿病例共上报740例，占新生儿科收治病例总数的2.70%（740/27 386），其中重度高胆红素血症620例（83.8%），极重度高胆红素血症106例（14.3%），危险性高胆红血症14例（1.9%）；诊断为急性胆红素脑病共4例（0.5%）。484例（65.4%）新生儿于分娩机构出院后因严重高胆红素血症返回医院住院治疗，中位入院日龄为7 d，其中214例（44.2%）再入院前进行过门诊黄疸随访，第1次门诊中位随访日龄为6 d。住院期间行头颅MRI检查211例（28.5%），其中85例（40.3%）提示双侧基底节、苍白球T1WI信号偏高；行脑干听觉诱发电位检查238例（32.2%），其中14例（5.9%）仅一侧通过，7例（2.9%）双侧均未通过。急性胆红素脑病或危险性高胆红素血症患儿（共17例）进行了随访，除1例失访外，均无异常神经系统症状。结论 新生儿严重高胆红素血症在新生儿科住院病人中的占比较高；新生儿从分娩机构出院后黄疸监测及管理需要加强；对并发了严重高胆红素血症的患儿，住院期间相关检查需更完善，出院后均需全面系统地随访。